999久久久国产精品,国产情侣一区二区,亚洲AV中文无码乱人伦在线视色,国产欧美一区二区三区在线看,欧美一区精品视频一区二区,色老头在线一区二区三区,又大又粗又硬又爽又黄毛片,国产98在线免费

熱門搜索:A549    293T 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 AKK菌
購物車 1 種商品 - 共0元
當(dāng)前位置: 首頁 > 行業(yè)資訊 > FHs 74 Int

FHs 74 Int

 

細(xì)胞描述
該細(xì)胞為正常的二倍體細(xì)胞,不具備無限增殖的能力。建議用戶收到細(xì)胞后,在細(xì)胞倍增
5~8 次內(nèi)完成實驗。
細(xì)胞特性
1) 來源:小腸
2) 形態(tài):上皮樣
3) 含量:>1x106
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝
運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到
后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80 度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)
生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
收到細(xì)胞后請拍照,3 天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
細(xì)胞接收后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)
胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時,最好在低倍鏡(4 5X 物鏡)下進(jìn)行,能
準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請在 10X 20×物鏡下,同時給剛收
到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各 2-3 張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)
胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,
75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h。
4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落
或者脫落后抱團(tuán)生長,可將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h,然后抽出瓶中
的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞 1000rpm 離心 5 分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照
說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細(xì)胞:T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和
細(xì)胞 1000rpm 離心 5 分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說
明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備 Hybri-Care Medium (ATCC, 46-X)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
rhEGFSigma, SRP 3027-500μg30 ng/ml;雙抗,1%;
培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱
濕度為 70%-80%
2)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加
4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)
1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)?
細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并
檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培
養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部
分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止
消化。
3. 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4
鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 12 15 的比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者
瓶中。
第一次傳代推薦傳代比例為 1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。
3細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
下面 T25 瓶為類;
1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓
脫落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加
入血清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于 1x106/ml,每
支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,至少 2 個小時以后轉(zhuǎn)入
液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立
即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注
意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
青河县| 江陵县| 东安县| 清河县| 开封县| 呈贡县| 交城县| 英吉沙县| 永济市| 汶上县| 德化县| 沅陵县| 兰州市| 土默特左旗| 马尔康县| 祥云县| 西城区| 垣曲县| 晋宁县| 宁波市| 龙陵县| 上杭县| 新郑市| 旬阳县| 安泽县| 潢川县| 蒲江县| 高清| 都江堰市| 泽州县| 保靖县| 左权县| 高安市| 柘荣县| 江口县| 深州市| 广水市| 三门县| 息烽县| 石首市| 延安市|