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人食管癌組織源性原代細胞
人食管癌組織源性原代細胞
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-4265
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人食管癌組織源性原代細胞
商品貨號 MZ-4265
組織來源 中國成年病人手術后的食管癌組織
規(guī)格 5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 食管上段癌腫多為鱗狀細胞癌。 食管中段癌腫多為鱗狀細胞癌。 食管下段癌腫多為腺癌。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
病理形態(tài)分析 (1)早期食管癌的病理形態(tài)分型:早期食管癌按其形態(tài)可分為隱伏型、糜爛型、斑塊型和 乳頭型。 (2)中、晚期食管癌的病理形態(tài)分型:分為髓質型、蕈傘型、潰瘍型、縮窄型、腔內型和 未定型。 少數(shù)中、晚期食管癌不歸入上述各型者,稱為未定型。
組織學分型 (1)鱗狀細胞癌:最多見。 (2)腺癌:較少見,又可分為單純腺癌、腺鱗癌、粘液表皮樣癌和腺樣囊性癌。 (3)未分化癌:較少見。
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